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動物生物安全二級（ABSL-2）實驗室適用於操作《人間傳染的病原微生物名錄》和《動物病原微生物分類名錄》中第三類動物病原微生物。在生命科學研究中，該類病原微生物是廣大科研工作者關注焦點，ABSL-2實驗室也成為目前開展感染性項目使用率最高的實驗室。

上海市公共衛生臨床中心的ABSL-2實驗室自2006年正式運行至今，已具有規範、穩定的生物安全運行體係，充分保障相關研究工作的安全開展。筆者根據多年來從事ABSL-2實驗室管理工作實際經驗，從實驗室資質審批及實驗申請、設施運行、人員、實驗操作管理、以及應急事件處置及防範等方麵，對實驗活動管理方麵的關鍵要素進行了歸納總結，供同行參考。

目前國家對ABSL-2實驗室的資質審批，普遍采取屬地管理，通常是實驗室所在地的衛健委或農委主管機構負責備案管理與審批。在提交備案申請前，實驗室應取得市科委頒發的"實驗動物使用許可證”，具有動物實驗活動資格；然後將申報資料提交區衛健委或農委主管機構審查備案。備案通過後，ABSL-2實驗室可開展備案相關病原體的科研活動。

實驗開展前，科研人員向所在機構生物安全委員會遞交“ABSL-2實驗室實驗活動申請表”申請審核批準。委員會委員將參照《人間傳染的病原微生物名錄》或《動物病原微生物分類名錄》要求嚴格審核。通過對實驗計劃進行風險評估後，經生物安全委員會批準，申請的實驗內容才可以實施開展。此外，實驗項目開展還需要通過動物實驗倫理審查。由所在機構的動物使用和管理委員會（IACUC）依據動物保護、動物福利、動物倫理和綜合性科學評估的原則，進行嚴格監督和評估，以盡量優化技術線路和方法，減少實驗動物數量。

ABSL-2實驗室內的環境參數，均參照生物安全實驗室建築技術規範和實驗室生物安全通用要求設計。實驗室內溫濕度自動控製，通過傳感器顯示在控製器麵板上並傳輸至中控室電腦係統，同時建立電視監控係統及溫度異常報警係統，方便工作人員實時監測實驗室內溫濕度變化。照明燈具定時控製，可調光照明係統用於調節燈光亮度，並設定調光係統定時開啟、關閉時間，保證了實驗動物對光亮度的需求。送排風機組由組合式送排風係統組成，采用一用一備自動切換的工作模式運行，實驗室送風采用經三級空氣過濾淨化後進入的全新風，送風和排風機製通過啟停和故障連鎖控製，此外，實驗室內通過調節排風以維持室內壓力和壓差穩定。嚴格的壓力梯度控製，為了防止交叉感染，ABSL-2實驗室內氣流必須從輔助區流向防護區，最終流入核心操作間。既保護設施，又保護實驗動物及實驗人員的安全。

資質管理：所有進實驗室的實驗人員，均必須接受培訓並通過考核持證上崗，包括“動物實驗上崗證”及“生物安全”雙證，既具備相關專業背景，又能熟練掌握動物實驗操作技能。

培訓與考核：人員培訓按崗位分類進行，以崗位職責為基礎，製定科學規範的人員培訓內容和考核體係。在生物安全培訓方麵，要製定分段式培訓計劃，從生物安全基本原理學習入手，到實驗室標準操作規範的指導性實踐訓練，再到帶教老師親自示範，一對一現場指導。培訓采用專題講座、知識競賽、示範練習、模擬演練等理論和實踐結合的方式。培訓結束後進行評估，評估培訓對象對培訓內容的記憶或操作執行情況，評估培訓對象工作中的行為變化，並建檔保存。

進出控製：采取嚴格的門禁授權方式，課題組項目應提前完成實驗活動危害性評估的申請審核，實驗人員接受ABSL-2實驗室內部培訓，且經考核合格後，才能被授權打開門禁。實驗人員進實驗室前需填寫“實驗預約登記表”並計劃好每周實驗時間，每次進入實驗室時須認真完成登記，在實驗室內嚴格按照標準操作程序(SOP)規定的路線進行個人防護裝備的穿戴及更換。

健康監測：對從業人員進行長期健康監測，留存本底血清，進行必要的疫苗接種，每年組織體檢並建立健康檔案；及時了解工作人員的健康狀況，確保人員的職業健康和福利。

個人防護：個人防護用品（PPE）使用是控製生物安全風險的終端措施，選擇和使用合適的PPE是避免ABSL2實驗室感染的關鍵。實驗人員在ABSL-2實驗室中，按照不同傳播途徑疾病的預防，針對重點防護部位謹慎選擇合適的PPE，並掌握正確使用方法，加強個人防護。實驗室中氣溶膠傳播是實驗人員發生獲得性感染的主要途徑之一，因此特別要加強呼吸防護。

規範操作：實驗室製定完整的管理體係文件,包括管理手冊、程序文件、標準操作規程、安全手冊、風險評估與應急預案、記錄表單等文件，實驗操作嚴格按照體係文件要求執行，保障各項實驗活動順利開展。

清場消毒：實驗結束後認真做好清場工作，所有實驗物品移出生物安全櫃前都應打包入高壓滅菌袋，並用適當的消毒劑對滅菌袋表麵消毒。動物調動後的IVC籠具在生物安全櫃內放入高壓滅菌袋內，經表麵消毒後高壓鍋滅菌，然後徹底清洗。未使用完的感染性生物材料、防護區的汙染材料等高壓滅菌銷毀，如實填寫操作和處理記錄。最後，生物安全櫃完成內壁的消毒擦拭後繼續運行10min，再紫外燈消毒15 min，然後關閉。一個實驗周期後，實驗室可用過氧化氫對空間進行熏蒸滅菌消毒，48h後開啟實驗室送排風係統，空置1周後做沉降菌濃度檢測，後續重新投入使用。

預案製定、組織應急演練、緊急事件處置三個環節，是缺一不可的三個核心環節。應按照實驗活動種類、設施設備狀況、人員能力現狀和管理體係文件的執行情況，製定生物安全事故應急防控預案；預案要適合本實驗室的特點，具有可操作性。每年定期安排相關人員應急演練培訓，熟悉意外發生後正確有效處置。一旦發生緊急事件，立即啟動應急處置程序：首先處理好菌毒種及感染性樣品，並做好現場消毒、滅菌處理，嚴防病原微生物擴散，並按照程序及時進行事故上報和處置。所有人員必須嚴格按照應急預案以及相關操作規程進行處理，以人身安全為第一原則。一旦發現工作人員出現了實驗相關病原微生物感染類似的臨床症狀，應立即匯報實驗室主任，並向生物安全委員會及單位負責人報告，按流程啟動相關應急處理方案，同時派專人陪同及時就診。